Innhold
- Antibiotika og hvordan de fungerer
- Antibiotikum-motstandsprøving
- Kirby-Bauer-testen
- Hvordan måle sonen for hemning
Bakterier er noen av de mest tallrike organismer på jorden. Forskere anslår at det er over en billion forskjellige arter av bakterier, utgjør over fem millioner billioner billioner (ja, det er to separate billioner) individer på planeten.
Ut av alle disse bakteriene, mindre enn 1 prosent forårsake sykdom hos mennesker. Disse sykdommene kan variere fra mageproblemer, som du kan få fra en mild infeksjon, til alvorlige og dødelige sykdommer som buksepest (forårsaket av Yersinia pestis bakterier) som drepte 50 millioner mennesker på 1300-tallet.
Det er grunnen til at oppdagelsen av antibiotika, som er medisiner som eliminerer bakterier, har reddet så mange liv. Problemet med bakterier er at de tilpasser seg og utvikler seg veldig raskt, noe som fører til at antibiotikaresistente bakteriestammer blir stadig mer vanlige. Måling av hemningssone for en belastning av bakterier kan fortelle forskere og leger om den er resistent mot et antibiotikum.
Antibiotika og hvordan de fungerer
Antibiotika er medisiner som dreper bakterier. De fungerer ved å målrette og resultere i død av bakterieceller mens du lar menneskets celler være i fred. Hvert antibiotikum fungerer på en litt annen måte ved å målrette bakteriespesifikke strukturer og signalisere for å eliminere dem.
For eksempel forstyrrer penicillin (et av de mest kjente antibiotikaene) bakteriecellevegger, noe som fører til at de ikke fungerer som de skal og dermed dør. Medisiner som fungerer som dette kalles beta-laktam antibiotika.
Makrolide antibiotika målrette bakterielle ribosomer. Dette forhindrer bakterier i å syntetisere proteiner, noe som betyr at bakteriene ikke kan overleve. Et vanlig eksempel er erytromycin, et antibiotikum som brukes til å behandle en rekke infeksjoner inkludert bronkitt og en rekke hudinfeksjoner.
Kinolon-antibiotika er en annen vanlig type antibiotika som virker ved å forstyrre bakterie-DNA.
Antibiotikum-motstandsprøving
Etter den første oppdagelsen av antibiotika i 1920-årene, skjønte forskere raskt at bakterier utviklet seg til å være resistente mot medisinene. Mange forskere forsøkte deretter å lage metoder som gjorde at de kunne teste hvor mottakelige bakteriestammer var for antibiotika for å forstå hva de hadde å gjøre med, så å si.
De første testene involverte seriefortynninger av bakteriell buljong spredt på plater med varierende konsentrasjoner av antibiotika for å bestemme mottakeligheten. Denne metoden tok imidlertid lang tid.
Kirby-Bauer-testen
Det er der Kirby-Bauer test kommer inn. Denne metoden ble standardisert av mikrobiologene W. M. M. Kirby og A. W. Bauer. Deres test tar ren bakteriekultur og striper den på en agarplate. Deretter plasseres en liten disk infisert med antibiotika (passende kalt en antibiotikadisk) på agarplaten. Ulike disker med forskjellige antibiotika blir plassert rundt platen, og bakteriene får ruv i en viss tid.
Når disken er plassert på platen, vil antibiotika begynne å diffundere. Hvis bakteriene som studeres er følsomme for antibiotika, vil ingen bakterier vokse nær disken fordi de blir drept av medisinen.
Men når du beveger deg lenger bort fra antibiotikadisken, vil konsentrasjonen av antibiotikumet avta. På en viss avstand fra disken, vil du begynne å se bakterievekst igjen fordi antibiotikakonsentrasjonen er for lav til å påvirke bakteriene.
Området rundt den antibiotiske disken som ikke har bakterievekst, er kjent som hemmingssonen. Inhiberingssonen er en jevn sirkulær sone uten bakterievekst rundt antibiotikaskiven. Jo større denne sonen er, jo mer følsom er bakteriene for det antibiotikumet. Jo mindre sonen er, desto mer motstandsdyktig (og dermed mindre følsom) er bakteriene.
Hvordan måle sonen for hemning
Foruten å navngi denne praksis og protokoll, opprettet forskere Kirby og Bauer også standardiserte diagrammer som brukte diameteren til hemmingssonen for å bestemme bakteriens følsomhet eller resistens mot bakteriene.
Disse sjøkartene finner du her og bruker bakterieartene, typen antibiotika som brukes og sonen med hemmingsdiameter for å bestemme om bakteriene er resistente, middels følsomme eller mottagelige for det antibiotikumet.
Merk: Du måler alltid hemmingssonen i form av millimeter.
For å måle hemmingssonen, plasser først platen på en ikke-reflekterende overflate. Ta en linjal eller tykkelse som måler i millimeter og plasser "0" i midten av antibiotikadisken. Mål fra midten av disken til kanten av området med null vekst. Ta målingen din i millimeter.
Dette måler radius av hemmingssonen. Multipliser det med to for å få diameteren.
Du kan også måle rett over hemmingssonen fra kant til kantkryssing gjennom midten av antibiotikaskiven for å måle diameteren direkte i stedet for å måle radius.