Innhold
Å isolere bakterier fra jord er et viktig første trinn i mange mikrobiologiske eksperimenter. Når de er isolert, kan bakterier analyseres ytterligere for å bestemme ting, for eksempel deres art og deres funksjon i jordsmiljøet. Selv en liten mengde jord kan inneholde millioner av bakterier, noe som gjør det nødvendig å fortynne en jordprøve før du isolerer bakterier fra prøven.
Mål 100 ml. destillert vann i gradert sylinder og tilsett den til den sterile flasken.
Vei ut 1 g av jordprøven og tilsett den til flasken med destillert vann.Tett på flasken og rist den for å blande løsningen grundig.
Merk de sterile prøverørene "10 ^ -3," "10 ^ -4," "10 ^ -5," og "10 ^ -6." Tilsett 9 ml destillert vann i hvert av rørene ved å bruke en av pipettene.
Overfør 1 ml av løsningen i flasken til røret merket "10 ^ -3," ved hjelp av en ny pipette. Kapp røret og surr det forsiktig til løsningen er godt blandet.
Overfør 1 ml av løsningen i prøverøret "10 ^ -3" til "10 ^ -4" -røret med en ny pipette. Sett på "10 ^ -4" røret og surr for å blande. Gjenta denne metoden for å overføre løsningen fra "10 ^ -4" -røret til "10 ^ -5" -røret og deretter fra "10 ^ -5" -røret til "10 ^ -6" -røret.
Plater tre prøver hver fra rørene "10 ^ -4," "10 ^ -5" og "10 ^ -6". Bruk en ny pipette til å overføre 1 ml løsning fra røret til en Petri-plate. Tilsett omtrent 15 ml næringsagar på platen; legg deretter lokket på platen og surr forsiktig slik at agaren dekker bunnen av platen.
Lag en kontrollplate ved å legge 1 ml destillert vann i en Petri-plate med en ny pipette. Legg til agar; sett på lokket og surr platen.
La Petri-platene stå stående til agaren har satt seg. Vend deretter platene og inkuber dem - enten i en rugemaskin eller ved romtemperatur - i så lite som 24 timer og opptil fem dager.
Fjern platene fra inkubatoren etter ønsket mengde inkubasjonstid. Telle bakteriekoloniene på plater som inneholder omtrent 30 til 300 kolonier. Bruk en permanent markør for å merke koloniene du allerede har talt for å unngå å telle de samme koloniene to ganger.
Del antall kolonier som er talt med fortynningen - "10 ^ -4," "10 ^ -5" eller "10 ^ -6" - av jordløsningen for hver plate. Finn antall dyrkbare bakterier i det opprinnelige gramgrunnen ved å beregne resultatene fra hver tellbare plate.