Kalibreringskurver brukes for å bestemme konsentrasjonen av ukjente stoffer basert på tidligere målinger av oppløsninger med kjente konsentrasjoner. Målingens presisjon og nøyaktighet er avhengig av kalibreringskurven. Jo bedre kurven er, desto mer nøyaktig er svaret, desto dårligere er kurven, desto dårligere nøyaktighet. Dette er en type sammenligningsmetode, det ukjente sammenlignes med en kjent.Kalibreringskurver brukes til alle typer målinger ved bruk av mange forskjellige maskiner. Dette eksemplet bruker et spektrofotometer.
Fortynn standardløsningen til forskjellige konsentrasjoner. Det er typisk å gjøre en 10 ganger fortynning, 20 ganger fortynning, 30 ganger fortynning eller en annen trinnvis løsning. Gjør hver fortynning to ganger slik at alle prøvene er i duplikat.
Beregn konsentrasjonene av de fortynnede løsningene. Et eksempel på den nye konsentrasjonen for 10 ganger fortynning ville være konsentrasjonen av den første løsningen multiplisert med 0,10.
Les absorbansen av de fortynnede løsningene på spektrofotometeret. Sett en kyvette inn i spektrofotometret slik at trekantmarkeringen blir stilt opp med lysbanen. Lukk lokket til spektrofotometret og trykk på null-knappen. Null maskinen med destillert vann hver femte prøve. Når maskinen er nullstilt, les prøvene på samme måte. Den eneste forskjellen er at du trykker på enter for å få absorbansen. Trykk enter når du har lukket lokket. Registrer disse verdiene i en notisbok.
Kartlegge absorbansen mot de beregnede kjente konsentrasjonene for alle prøver. Den kjente konsentrasjonen vil være på X-aksen og absorpsjonsevnen på Y-aksen. Det er best å lage grafen i et datagrafikkprogram.
Bruk grafprogrammet til å beregne regresjonslinjen for de grafiske punktene. Det er mulig å slette ett av de to punktene for hver fortynning for å få den beste regresjonslinjen. Dette er poenget med å gjøre hver fortynning i duplikat. Jo nærmere R ^ 2-verdien er en, jo bedre blir regresjonslinjen. Noter regresjonslinjeligningen.
Les absorpsjonsevnen til den ukjente konsentrasjonsløsningen på spektrofotometeret. Registrer denne absorbansen.
Beregn konsentrasjonen av den ukjente løsningen ved å bruke regresjonslinjeligningen. Den ukjente absorpsjonsevnen erstattes som Y i ligningen. Du løser ligningen for X, konsentrasjonen.