Innhold
- HPLC og lignende teknikker
- Hastighet, effektivitet og nøyaktighet
- Kostnad og kompleksitet
- Følsomhet og oppløsning
HPLC tilbyr en rask, automatisert og svært nøyaktig metode for å identifisere visse kjemiske komponenter i en prøve, men det kan være kostbart, komplekst og fungerer ikke for alle prøver. Medisinske, rettsmedisinske, miljø- og produksjonslaboratorier bruker teknikken for å kvantifisere og separere kjemikaliene i en prøve. HPLC har både fordeler og ulemper sammenlignet med andre teknikker.
HPLC og lignende teknikker
Som andre former for kromatografi tillater HPLC separasjon av kjemiske bestanddeler ved bruk av en mobil fase og en stasjonær fase. Den mobile fasen er flytende og den stasjonære fasen er solid. Fordi de forskjellige komponentene beveger seg i forskjellige hastigheter, skiller de seg fra hverandre. Alternative teknikker inkluderer kapillærelektroforese, hvor stoffer vandrer gjennom oppløsninger i et elektrisk felt, og andre kromatografiske metoder som fastfaseekstraksjon, gasskromatografi og tynnsjiktskromatografi.
Hastighet, effektivitet og nøyaktighet
Sammenlignet med andre kromatografiske teknikker, for eksempel TLC, er HPLC ekstremt raskt og effektivt. Den bruker en pumpe, snarere enn tyngdekraft, for å tvinge et flytende løsningsmiddel gjennom et fast adsorbentmateriale, med forskjellige kjemiske komponenter som skilles ut når de beveger seg i forskjellige hastigheter. Prosessen kan fullføres på omtrent 10 til 30 minutter, og den gir høy oppløsning. Den er nøyaktig og svært reproduserbar. Fordi det i stor grad er automatisert, kan grunnleggende HPLC-kjøringer utføres med minimal trening.
Kostnad og kompleksitet
Til tross for fordelene med dette, kan HPLC være kostbart og krever store mengder dyre organiske stoffer. Teknikker som fastfaseekstraksjon og kapillærelektroforese kan være billigere og enda raskere, spesielt for analyse under god produksjonsskikk. Selv om det er relativt enkelt å bruke eksisterende HPLC-metoder, kan det være komplekst å feilsøke problemer eller å utvikle nye metoder. Dette er i stor grad på grunn av rekke forskjellige moduler, kolonner og mobile faser.
Følsomhet og oppløsning
Generelt er HPLC allsidig og ekstremt presis når det gjelder å identifisere og kvantifisere kjemiske komponenter. Med mange trinn involvert er presisjonen til HPLC i stor grad ned til prosessen som blir automatisert og derfor meget reproduserbar. HPLC har lav følsomhet for visse forbindelser, og noen kan ikke oppdages da de er irreversibelt adsorbert. Flyktige stoffer skilles bedre ut ved gasskromatografi.