Innhold
HPLC (high performance liquid chromatography) og GC (gasskromatography) er begge metoder forskere bruker for å analysere prøver for å bestemme hva prøven inneholder eller konsentrasjonen av molekyler i prøven. Begge bruker det samme prinsippet, at tyngre molekyler eluerer eller flyter saktere enn lettere molekyler (polaritet spiller også en rolle i elueringstiden). Selv om ideen er den samme, har GC og HPLC flere forskjeller.
Mobilfasen
Den mobile fasen til kromatografisk utstyr er stoffet som beveger prøven gjennom maskinen. I HPLC er den mobile fasen en væske som består av et organisk løsningsmiddel, ultrapurvann og andre ingredienser for å sikre dets forenlighet med prøven. GC bruker gass til sin mobile fase. Gasser som brukes inkluderer helium, nitrogen, argon eller hydrogen, avhengig av hva som analyseres.
Søylene
Når prøvene beveger seg over kromatografisøyler, samvirker prøven og mobilfasen med kolonneinnholdet, noe som fører til at komponentene i prøven elueres til forskjellige tidspunkter. HPLC-søyler er typisk fire til seks tomme lange metall- eller glassrør tettpakket med silika eller forskjellige karbonkjedelengder. GC-systemer har kveilede kapillarsøyler med innvendige vegger belagt med forskjellige materialer avhengig av laboratoriets behov. GC-kolonner er strukket ut og kan nå lengder på 100 fot.
Prøvene
GC brukes til flyktige forbindelser (de som brytes raskt ned) mens HPLC er bedre for mindre flyktige prøver. Hvis en prøve inneholder salter eller har en ladning, må den analyseres ved bruk av HPLC, ikke GC.
Temperatur kontroll
GC-søyler er plassert i en ovn i maskinen. En datamaskin endrer temperaturen mens prøvene blir analysert. Jo høyere temperatur, jo raskere eluerer prøven, men temperaturer som er for høye gir dårlige resultater. HPLC-kolonner holdes på en stabil temperatur (oftest romtemperatur) til enhver tid.