Innhold
- Bedre visualisering
- Identifikasjon og klassifisering
- Påvisning av levedyktighet
- Identifisering av cellulære strukturer
Mikrobiologer studerer egenskapene til mikroorganismer som alger, protozoer, bakterier, sopp og virus ved hjelp av et mikroskop. Mens noen organismer som protozoer og gjærceller er enkle å observere ved bruk av en våt montering, krever bakterieceller farging. Forskere utviklet flere metoder som Gramfarging, syrehurt farging og lysstofffarging for bedre visualisering av bakterieceller og cellestrukturer. Ved bruk av slike fargemetoder er det mulig å identifisere strukturelle funksjoner som hjelper til med å klassifisere bakterier.
Bedre visualisering
Bakterielle organismer er så små at de fleste av dem bare er synlige under et mikroskop med en forstørrelseseffekt på 1000X. Ren forstørrelse av størrelsen gir imidlertid ikke en tilstrekkelig grad av klarhet, slik at bakterier derfor må farges før observasjon for å gi den klarhet som er nødvendig for visualisering.
Identifikasjon og klassifisering
Farging av bakterier for å skille mellom bakterietyper er kjent som forskjellig farging. Gram-flekken er en slik forskjellig flekk som skiller mellom bakterier på grunnlag av cellevegginnholdet. I denne metoden reagerer bakteriecellene med en krystallfiolett flekk for å få en fiolett farge. Når du legger til et avfargingsmiddel, mister noen bakterieceller farge, mens andre ikke gjør det. Når de tilfører safraninbeis, tar de fargede cellene opp flekken for å virke røde mens bakteriecellene som ikke mistet fargen forblir fiolette. Bakteriecellene som tar opp rødfargen kalles Gram-negative organismer, og de som ikke tar opp fargen er klassifisert som Gram-positive organismer. Gramfarging gir en rask metode for initial identifisering av bakterier involvert i infeksjoner. Tilsvarende hjelper den syrehurtige fargeprosedyren til spesifikt å identifisere organismer som tilhører klassen bakterier kalt Mycobacteria, for eksempel Mycobacterium tuberculosis.
Påvisning av levedyktighet
I bakteriekulturprøver er det ofte viktig å oppdage tilstedeværelsen av levende bakterieceller. Farging metoder som fluorescerende farging hjelper til med å identifisere om dyrkningsceller er levedyktige eller ikke. Levende bakterier har muligheten til å konvertere 5-Cyano-2,3-ditolyl Tetrazolium Chloride (CTC) flekken til et fargestoff som viser en rød fluorescens. Derfor, når kulturer farget med CTC avgir slik fluorescens, indikerer det tilstedeværelsen av levedyktige bakterier. Propidiumjodid er en flekk som bare virker på ikke-levende celler som har skadede membraner, og derfor er nyttige for å identifisere døde bakterieceller.
Identifisering av cellulære strukturer
Farging gir en metode for å tydelig visualisere flere cellulære strukturer. For eksempel tillater Fuelgen-fargningsmetoden identifikasjon av kjernen i bakterieceller, mens Alberts flekk er nyttig for å visualisere metakromatisk granulat. På samme måte tillater sølvimpregneringsteknikken identifikasjon av spiroketer. Flagella er enkle å observere når de er farget med Ryus flekk. Malakittgrønn farging hjelper til med å identifisere bakteriesporer.