Som tilfelle når du bruker et vitenskapelig instrument, må du sørge for at instrumentet er i god stand før du bruker det til å analysere en prøve. Kontroll av instrumentets respons for en kjent prøve bekrefter at instrumentet er riktig kalibrert. Spektrofotometre krever periodisk kalibrering for å sikre riktig respons av instrumentet. Infrarøde (IR) spektrofotometre bruker polystyren som en kalibreringsstandard. En skanning av instrumentet med et stykke isopor i prøveholderen vil verifisere tilstedeværelsen av topper sett på IR-spektra og den relative intensiteten til toppene.
Slå på spektrofotometeret og la det varme opp i minst 10 minutter. Oppvarmingstiden er nødvendig for at kilden skal stabilisere seg. Uten en stabil kilde kan du ikke stole på de oppnådde spektrene. Det analytiske signalet er avhengig av at prøven demper kildestrålingen.
Kjør kalibreringsstandarden ved å plassere et stykke isoporfilm i prøveholderen. Uten en testkjøring med en prøve av kjente spektre kalt en standard, har du ingen sikkerhet for at spektrofotometeret fungerer som det skal.
Hent spektrene for polystyrenprøven. Sammenlign spektrene med det i en standardreferanse for IR-spektre. Forsikre deg om at alle forventede topper finnes på testspektre. Plasseringen av toppene må samsvare med absorpsjonens bølgelengde.
Sjekk spektrene for å forsikre deg om at styrken til signalet er innenfor 95 prosent av det maksimale for den sterkeste toppen. Hvis den sterkeste toppen i spektrene er mer eller mindre enn full skala, juster dempingen for å levere riktig signalstyrke.
Kalibrer IR-spektrofotometeret ofte. En minimum kalibreringsfrekvens bør omfatte en skanning rett før og en like etter arbeidet ditt på dagen.