Innhold
Kromatografiske teknikker utføres i vitenskapelige laboratorier for å skille kjemiske forbindelser fra en ukjent prøve. Prøven oppløses i et løsningsmiddel og strømmer gjennom en kolonne, hvor den blir separert ved tiltrekning av forbindelsen mot materialet i kolonnen. Denne polare og ikke-polare attraksjonen til kolonnematerialet er den aktive kraften som får forbindelsene til å skille seg over tid. De to typene kromatografi som brukes i dag er gasskromatografi (GC) og høyytelses væskekromatografi (HPLC).
Mobil transportfase
Gasskromatografi fordamper prøven, og den blir ført langs systemet av en inert gass som helium. Å bruke hydrogen gir bedre separasjon og effektivitet, men mange laboratorier forbyr bruk av denne gassen på grunn av dens brennbare natur. Ved bruk av væskekromatografi forblir prøven i sin flytende tilstand og skyves gjennom kolonnen under høyt trykk av forskjellige løsningsmidler som vann, metanol eller acetonitril. Ulike konsentrasjoner av hvert løsningsmiddel vil påvirke kromatografien av hver forbindelse forskjellig. Når prøven forblir i flytende tilstand øker forbindelsens stabilitet.
Kolonnetyper
Gasskromatografisøyler har en veldig liten indre diameter, og deres lengde kan variere fra 10 til 45 meter. Disse silikabaserte søylene er sammenrullet langs en sirkulær metallramme og oppvarmet til en temperatur på 250 grader Fahrenheit. Flytende kromatografisøyler er også silikabaserte, men har et tykt metallhus for å motstå høye mengder indre trykk. Disse kolonnene fungerer under romtemperatur og varierer fra 50 til 250 centimeter i lengde.
Sammensatt stabilitet
Ved gasskromatografi fordampes prøven som injiseres i systemet ved ca. 400 grader Fahrenheit før den føres gjennom kolonnen. Dermed må forbindelsen tåle varme ved høye temperaturer uten å bryte ned eller nedbrytes til et annet molekyl. Flytende kromatografiske systemer lar forskeren analysere større og mindre stabile forbindelser fordi prøven ikke blir utsatt for varme.